时隔3年后，韩春雨发布最新成果论文

时隔3年，曾处于舆论旋涡的韩风雨公开了一项最新研究者成果。近日，韩风雨在先于刻印主页BioRxiv上刊出了一篇关于基因组编辑的新社论：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。社论共计5名译者，依次为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，兼职单位外为保定科技大学基因组编辑研究者中都心。其中都，韩风雨为通信译者。据了解，文中中都谈到的CasE是Ⅰ-E型 CRISPR复合物的核心成分，它通过相结合特定的茎环区域除此以外解决问题pre-crRNA，称之为 CasE Binding S，全称为CBS。CasE开明His20作准备催化来生性，ΔHis26-TtCse3突变的CasE（dCasE）则保住了催化来生性，但无论如何与其核酸紧密相结合。在该研究者中都，通过将 split 紫外光与dCasE的N端和C-下侧（ΔHis20）融入，构建了来生体RNA行踪方法VN-dCasE-VC。该系统对仅在共存靶RNA时才下达紫外光，从而弱化准确性。在来生细胞内中都进行仿真的RNA监视，不需要特定的亚细胞内分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T细胞内中都的高水平理解和都为表明CasE和dCasE适合来生细胞内中都的RNA操作。为了测试CasE在两栖类细胞内中都理解时应该不具极强来生性，译者构建了“关闭”报告基因组核酸CBS-GFP-N1。它由5′-UTR中都的GFP mRNA和CasE相结合基因组座（CBS）分成。当CasE被扩展系统对时，GFP理解水平急剧下降。同时，为了有利于测试CasE来生性，译者还构建了“开启”报告基因组核酸RED-16×CBS-Lin28-C1，其中都CBS插入RED乙烯基因组的3′-UTR区和Lin28的中上游。Lin28是RNA核保留路径，在其3′-UTR中都不具lin28路径的RED乙烯mRNA几乎不能翻成蛋白质。CBS-CasE贫乏限制性绕过lin28路径并从核释放靶mRNA用于翻译（上图1E和上图1F）。这些表明CasE可以相结合并研磨两栖类细胞内中都的CBS。另外，为了将dCasE-CBS相互作用的设计到RNA监视系统对中都，译者通过将split-FP5-7与dCasE蛋白相结合。发现一个原版，即VN-dCasE-VC不太可能下达紫外光，这可能是由于不正确的折叠或不稳定的状态，但是当与靶RNA（CBS）相结合时，可以在紫外光显微镜下清楚地脱逃紫外光路径，即使VN-dCasE-VC理解核酸的转染剂量非常低。整整，译者使用VN-dCasE-VC系统对监视两栖类细胞内中都过理解的β-肌动蛋白（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC系统对在细胞内质中都推断出极强紫外光。此外还通过观察到，向靶mRNA附加更多CBS可更佳路径，紫外光监视更清晰，因此，可以通过降低CBS的数量来检测低丰度的mRNA。总的来说，韩风雨制作团队发明了一种属于自己RNA监视方法，将其取名为VN-dCasE-VC，该系统对能够监视来生细胞内中都没剧中的特定RNA，通过紫外光将其仿真。在此之前早两种来生细胞内RNA监视核磁共振方法，一种是MS2，一种是Cas13a，韩风雨制作团队研发的dCasE系统对，核磁共振效用由于MS2，而且，dCasE蛋白的分子量为22kDa，远小于Cas13a的130kDa，dCasE的小分子量更容易发送给至细胞内内，因此更适合用于来生细胞内的RNA监视。一位接近韩风雨的部分人交代：“这篇社论是当年韩风雨兼职的直到现在，目的都是研发基因组编辑方法。”不过，值得注意的是，该研究者在此之前刊出于先于刻印主页，尚未经过随行评议，对此，有科研部分人援引，亮相在未经随行评议的先于刻印上，是为了赢取亮相全权。“韩风雨下一步还会改投同年学报的。”前述部分人推测。不知道此次属于自己研究者成果应该会再次给韩风雨带来非议，2016年5同年，《纯净—脊椎动物高效率》刊出韩风雨制作团队属于自己基因组编辑高效率NgAgo，被新闻媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的故事原型炒作而走红，之后半年，韩风雨个人及其所在大学下半年赢取各类名誉和大量经费资助，但亦有国际间多名基因组编辑科技领域科学家实名发声称科学研究结果难以重复使用，怀疑科学研究结果的真实性。2017年8同年，《纯净—脊椎动物高效率》刊出一本书《是该样本说话的时候了》社论，同月撤回韩风雨制作团队于2016年5同年2日刊出在该学报的文中。2018年9同年，保定科技大学发布公告，韩风雨制作团队不共存主观造假。但依据有关规定，取消韩风雨所赢取的金质奖章，延后韩风雨制作团队履行的科研项目并返还科研经费。韩风雨制作团队回应称，科学研究的设计共存瑕疵、研究者过程共存着不严谨的关键问题。有大众部分人表示：“这波之后，NgAgo这个研究者方向在中都国继续做得比较慢。韩风雨他们的兼职开展好像也比较吃力，连师生也没新招。”